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　　ELISA實驗操作要點：樣本收集及保存操作不當會影響實驗結果

　　一、樣本收集不當的影響

　　假陽性結果?：嚴重溶血時，血紅蛋白自帶過氧化物酶活性，會催化底物非特異性顯色;樣本被細菌污染，菌體含內源性HRP，也會引發假陽性。

　　假陽性干擾?：血液未全凝固就強行離心，殘留的纖維蛋白原會在孔內形成絮狀沉淀，難以洗凈，直接造成假陽性結果。

　　結果偏差?：用含EDTA、NaN?的容器收集樣本，會抑制辣根過氧化物酶活性，導致顯色偏弱，出現假陰性。

　　二、樣本保存不當的影響

　　目標物降解?：樣本反復凍融、長期在室溫放置，會讓待測蛋白變性失活，濃度大幅降低，最終得到假陰性結果。

　　非特異性升高?：4℃存放超過5天，血清中IgG會發生聚合，間接法實驗的本底值明顯升高，干擾結果判讀。

　　樣本污染變質?：未密封存放的樣本易被交叉污染，不同批次樣本間相互干擾，大幅增加實驗隨機誤差。

　　三、規范操作要點

　　收集環節?：血清用無熱原試管采集，室溫放置2小時待凝固后，3000轉離心10分鐘分離上清，全程避免溶血。

　　保存環節?：按單次檢測用量分裝，短期2-8℃存放不超過5天，長期凍存于-20℃/ -80℃，嚴格杜絕反復凍融。

　　復融環節?：凍存管凍存樣本在15-25℃水浴快速復融，混勻后再次離心去除沉淀，再用于后續檢測。

　　注：以上科研產品資料供參考!

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