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試劑盒的顯色液(TMB)和終止液是什么成分?有何注意事項?
更新時間:2026-08-28瀏覽:151次

  試劑盒的顯色液(TMB)和終止液是什么成分?有何注意事項?


  本生BUNSEN TMB顯色液和終止液是ELISA等基于HRP標記實驗的配套試劑,二者成分明確,使用時需嚴格遵循操作規范才能保證實驗結果可靠。

  一、TMB顯色液成分

  底物?:3,3',5,5'-四甲基聯苯胺(TMB),化學式C??H??N?,是辣根過氧化物酶(HRP)的特異性顯色底物。

  輔助組分?:單組分成品中通常添加(氧化劑)、pH緩沖體系、低濃度異噻唑啉酮類防腐劑,無需額外配制即可直接使用。

  二、終止液成分

  常規酸性終止液?:主流配方為0.25M HCl、0.3M H?SO?或2M H?SO?,通過強酸環境讓HRP瞬間失活,同時將藍色產物轉化為穩定黃色產物。pH緩沖液

  低腐蝕替代款?:部分商用產品采用低腐蝕性有機酸配方,規避強腐蝕性危化品的管控限制,適配450nm波長檢測。

  特殊中性終止液?:0.1% NaF溶液,可保留藍色產物,適配650nm波長直接讀數,無需顏色轉換。

  三、TMB顯色液使用注意事項

  儲存條件?:2-8℃避光密封保存,避免反復凍融,使用前需提前恢復至室溫,禁止陽光直射。

  操作防污染?:嚴禁槍頭直接插入試劑瓶內取液,倒出的剩余試劑禁止倒回原瓶;避免使用金屬、玻璃容器盛裝,防止氧化還原劑污染。

  安全防護?:試劑對皮膚、黏膜有刺激性,操作需佩戴手套,在通風環境下進行。

  反應控制?:過高濃度的HRP會導致顯色異常發綠或出現沉淀,需適當稀釋酶結合物或縮短孵育時間。

  四、終止液使用注意事項

  反應終止時機?:以最高濃度標準品孔變為深藍色、陰性對照孔剛顯淺藍色為最佳終止點,避免顯色不足或反應過度。

  加樣操作規范?:加樣順序需與之前加顯色液的順序保持一致,每孔加完后立即輕拍酶標板混勻,避免局部酸濃度不均。

  讀數時效控制?:終止后15-30分鐘內完成讀數,超時會導致OD值下降、本底升高,信號穩定性變差。

  試劑狀態核查?:使用前確認終止液為無色澄清狀態,若出現變黃、沉淀則說明已污染失效,必須重新配制。

  注:以上資料僅供參考,不作為實際數據,實驗需嚴格遵循說明或咨詢技術老師。

  本生BUNSEN科研耗材適應客戶:醫院檢驗科PCR實驗室,中心實驗室,肝病中心;第三方檢測機構,科研院所,大專院校,制藥廠,試劑生產廠家,疾控中心,檢驗檢疫。

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